Targeted editing of intronic-splicing silencer enhancement of SMN2 Exon 7 inclusion by CRISPR/Case 9

Spinal muscular atrophy (SMA) is an autosomal recessive hereditary neuromuscular disease. Exon 7 and 8 of survival of motor neuron 1 (SMN1) gene or only exon 7 homology deletion leads to the failure to produce a full-length SMN gene. The copy number of SMN2 gene with high homology of SMN1 affects the degree of disease and was the target gene for targeting therapy, in which splicing silencer in intron 7 was the key to suppress the inclusion of exon 7. In this study, we projected to use CRISPR/Case 9 for the targeted editing of intronic-splicing silencer (ISS) sequence to promote the inclusion of SMN2 exon 7 and increase the production of SMN2 full-length (FL) gene expression. It happens that there was a protospacer adjacent motif (PAM) at one end of the ISS sequence according to the design of sgRNA. The recombinant vector of sgRNA HSMN2 CRISPR/Case 9 was constructed and transfected into HEK293 cells. Sequencing results showed that the ISS sequence could be edited accurately and targeting in the predicted direction, in which deleting small fragments, inserting small amounts and mutation. Quantitative analysis of RT-PCR products by restriction enzyme of DdeI digestion showed that the FL of SMN2 increased by 8% (P < 0.05). In the primary cultured chondrocytes of SMA mice, in which sgRNA HSMN2 CRISPR/Case9 recombinant vector transfection could increase the SMN2 FL gene by 23% (P < 0.05) and significantly improve SMN protein levels (P < 0.05). CRISPR/Case 9 is an effective tool for gene editing and therapy of hereditary diseases, but it is rarely reported in the treatment of SMA diseases. This study shows that CRISPR/Case 9 was first used for the precision target of ISS sequence editing, which can effectively promote the production of SMN2 FL gene expressions, in which there was an important clinical reference value.     

建筑用气密膜相关强度性能试验研究

气密膜是被动房和超低能耗建筑气密性处理的常用材料,由于试验设备及方法等原因,国内对建筑用气密膜性能的试验研究较少,从施工应用角度出发,针对国内外无纺布基气密膜的相关强度性能开展试验研究,为气密膜的工程应用提供参考.     

伊拉克米桑油田水平井钻井关键技术

针对伊拉克米桑油田盐膏层巨厚、钻井液密度窗口窄、存在高压盐水层,储层段漏塌同层导致复杂时效高等问题,通过对比分析国内外盐膏层和窄压力窗口地层钻井技术,总结了米桑油田钻井面临的主要技术难点,从井身结构优化、钻井提速和复杂预防等方面入手,研究形成了适合米桑油田的钻井关键技术,并进行了现场试验应用,取得了显著的效果.伊拉克米桑油田钻井关键技术对该地区钻井技术方案设计和钻井提速提效具有较强的借鉴和指导作用.     

水厂生产废水处理工艺节地高效化设计探索

随着对环保及自用水率的要求日益严格,水厂生产废水的减排已成为发展趋势.但既有水厂用地紧张和生产废水的处理工艺占地多存在矛盾,制约了水厂新增生产废水处理工艺的可行性.文中引入斜管沉淀提升沉淀效率、取消浓缩池、使用叠螺脱水机代替离心脱水机的优化设计方案,相较原设计的传统分离式生产废水处理工艺,生产废水停留时间减少75％,占地面积减少约48％.实践证明,该优化设计方案能够有效解决水厂生产废水处理工艺设计过程中遇到的用地不足问题,并有效地降低建设投资.     

基于有限元的低成本塔桅设计及承载能力分析

为研究铁塔公司发布的最新《低成本铁塔标准图集V1.0》的共享改造能力,文章选取了单斜撑三管塔0.65 kN/m2基本风压下的系列塔图,从各塔段的主管应力比和塔顶位移角两个角度,考虑新增天线设备、馈线、爬梯荷载,以及天线设备之间的相互遮挡,利用有限元软件SAP2000对每种塔型进行了常规设计分析和改造增载后的研究分析.由分析结果可知,每种塔型均有可共享改造能力,且随着塔身高度的增加,共享改造的能力逐渐降低.     

大型球铁水表壳加工工装设计与加工

针对表壳具有较多复杂曲面及三端加工特点及需求,通过对球铁水表壳的外形及加工特点进行分析,提出合理的设计加工工序方案,选用特种加工设备及专业的工装夹具.通过针对表壳外形及加工工艺特点设计专业的工装夹具达到一次装夹多工序同时加工,有效解决了传统加工工艺的多工序多道加工,提高加工效率并确保加工质量.     

ZIF衍生氧还原反应催化剂的研究进展

从沸石咪唑酯骨架材料(ZIF)衍生的含过渡金属催化剂出发,介绍ZIF衍生催化剂前驱体的制备和热解温度、气氛对催化剂的影响,总结ZIF衍生的铂和非贵金属催化剂材料用于氧还原反应(ORR)的研究进展.提出有关ZIF衍生ORR催化剂发展面临的实际应用挑战和活性位点探究问题.     

P6软件在大型主题公园建设中的应用

目前国内在施项目多应用Microsoft excel、Project或梦龙等管理软件进行计划编制与跟踪管理,某大型文化旅游项目建设中应用P6软件,该软件以计划编制→跟踪→更新→反馈→调整为主线,从时间、资源、费用等多个管理维度,针对大型综合项目呈现出一套综合性管理方案,提高了项目管理水平,取得了良好效果.     

新型绿化用结构土在大型主题公园中的应用

北京某文旅主题公园项目施工中,针对临近道路承载影响植物根系发育和植物根系发育过程中对面层破坏的问题,研究新型环保绿化用结构土技术.使用碎石、粘壤土、土壤改良剂、水等材料的最佳配合比,制成了一种新型绿化用结构土,既满足了硬质路面承载要求,又满足了植物根系地下环境生长需求,还提高了海绵城市效能.